5.血清解凍以后出現(xiàn)了懸浮物是什么?還能繼續(xù)用嗎?
解凍以后如果發(fā)現(xiàn)有少量乳白色的絮狀或者點狀物質(zhì),這種主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量,可用400×g離心5 min取上清。不會對細胞有太大的影響。
6.血清在使用前是否需要對血清進行過濾?
一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。
7.使用血清培養(yǎng)細胞以后,鏡下觀察到會動的“小黑點"會是污染嗎?
如果您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,黑點是否做不規(guī)則游動。如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
(1)細胞生長過程中自然破碎后的細胞殘骸;
(2)血清中的雜蛋白,可能是反復(fù)凍融的結(jié)果;
(3)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點;
(4)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。
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