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細(xì)胞培養(yǎng)過程中應(yīng)該注意哪些問題?#1細(xì)胞培養(yǎng)步驟一般包括:解凍、培養(yǎng)、分盤、凍存?;旧隙甲裱@個(gè)步驟,細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程,我們往往發(fā)生在步驟3,在做細(xì)胞功能性實(shí)驗(yàn)時(shí),往往在步驟2,解凍和凍存就是細(xì)胞的儲(chǔ)藏和分離的過程。#2首先我們要獲得細(xì)胞,一般受大家比較認(rèn)可的細(xì)胞庫有1962年ATCC建立的CELLLINES、中科院、DSMZ等機(jī)構(gòu)。#3細(xì)胞解凍要求37度快速解凍,另外就是注意不同細(xì)胞的培養(yǎng)條件。#4同規(guī)格培養(yǎng)器皿所需要的細(xì)胞生長密度也不同,如下圖:#5細(xì)胞生長會(huì)產(chǎn)生各種代謝廢...
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什么是細(xì)胞系?1、細(xì)胞系(細(xì)胞株)細(xì)胞系是來自多細(xì)胞生物體的細(xì)胞群體,其通常不會(huì)無限增殖,但是由于突變,逃避了正常細(xì)胞的衰老,從而可以持續(xù)分裂的一種細(xì)胞的集合。因此,細(xì)胞可以在體外長時(shí)間生長。細(xì)胞系是研究多細(xì)胞生物體的生物化學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的非常重要的工具,例如信號(hào)通路、腫瘤殺傷、細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、突變分析、基因表達(dá)、蛋白表達(dá)、細(xì)胞分化等等。此外,永生化的細(xì)胞系也已經(jīng)在生物技術(shù)中得到應(yīng)用,比如建立新來源、新突變的細(xì)胞系。2、克隆細(xì)胞株從一個(gè)經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系用單細(xì)胞分離培...
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耐藥株是怎樣煉成的?近年來,惡性腫瘤(癌癥)已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅中國人群健康的主要公共衛(wèi)生問題之一。為什么癌癥容易復(fù)發(fā),很難治愈呢?因?yàn)榻^大部分抗腫瘤藥物,最終都逃不過腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性的命運(yùn),導(dǎo)致癌癥繼續(xù)發(fā)展。對(duì)于腫瘤細(xì)胞耐藥的產(chǎn)生原因仍然處在研究之中,如何改善腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物耐藥依然是目前研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。01什么是耐藥性?化療是治療惡性腫瘤的方法中有效的手段之一,指用化學(xué)藥物的方法殺死腫瘤細(xì)胞。常用的藥物包括細(xì)胞增殖的抑制劑、DNA損傷修復(fù)途徑的抑制劑,如阿霉素(adri...
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小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞RGC-5培養(yǎng)小技巧簡(jiǎn)介:培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%P/S生長狀態(tài):貼壁生長不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。將細(xì)胞懸浮在溶液中,隨著溫度降低,細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰,所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡;未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高,如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長,細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞,細(xì)胞便發(fā)生滲漏,因此復(fù)溫時(shí)大量水分會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),造成細(xì)胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑,則可保護(hù)細(xì)胞免受溶...
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小鼠淋巴瘤細(xì)胞YAC-1培養(yǎng)技巧培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%P/S生長狀態(tài):懸浮凍存細(xì)胞,不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。將細(xì)胞懸浮在溶液中,隨著溫度降低,細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰,所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡;未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高,如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長,細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞,細(xì)胞便發(fā)生滲漏,因此復(fù)溫時(shí)大量水分會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),造成細(xì)胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑,則可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷和...
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正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞TM4培養(yǎng)條件:DMEM/F12+2.5%FBS+5%馬血清+1%P/S生長狀態(tài):貼壁生長凍存細(xì)胞,不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。將細(xì)胞懸浮在溶液中,隨著溫度降低,細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰,所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡;未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高,如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長,細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞,細(xì)胞便發(fā)生滲漏,因此復(fù)溫時(shí)大量水分會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),造成細(xì)胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護(hù)...
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小鼠雜交瘤(抗CD2)細(xì)胞OKT11培養(yǎng)條件:IMDM+20%FBS+1%PS生長狀態(tài):懸浮生長凍存細(xì)胞,不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。將細(xì)胞懸浮在溶液中,隨著溫度降低,細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰,所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡;未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高,如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長,細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞,細(xì)胞便發(fā)生滲漏,因此復(fù)溫時(shí)大量水分會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),造成細(xì)胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑,則可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)...
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小鼠乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記4T1+luc培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%P/S生長狀態(tài):貼壁生長凍存細(xì)胞,不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。將細(xì)胞懸浮在溶液中,隨著溫度降低,細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰,所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡;未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高,如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長,細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞,細(xì)胞便發(fā)生滲漏,因此復(fù)溫時(shí)大量水分會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),造成細(xì)胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑,則可保護(hù)細(xì)胞免...
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