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細(xì)胞培養(yǎng)過程中應(yīng)該注意哪些問題？

細(xì)胞培養(yǎng)過程中應(yīng)該注意哪些問題？#1細(xì)胞培養(yǎng)步驟一般包括：解凍、培養(yǎng)、分盤、凍存?；旧隙甲裱@個(gè)步驟，細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程，我們往往發(fā)生在步驟3，在做細(xì)胞功能性實(shí)驗(yàn)時(shí)，往往在步驟2，解凍和凍存就是細(xì)胞的儲(chǔ)藏和分離的過程。#2首先我們要獲得細(xì)胞，一般受大家比較認(rèn)可的細(xì)胞庫有1962年ATCC建立的CELLLINES、中科院、DSMZ等機(jī)構(gòu)。#3細(xì)胞解凍要求37度快速解凍，另外就是注意不同細(xì)胞的培養(yǎng)條件。#4同規(guī)格培養(yǎng)器皿所需要的細(xì)胞生長密度也不同，如下圖：#5細(xì)胞生長會(huì)產(chǎn)生各種代謝廢...

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什么是細(xì)胞系？

什么是細(xì)胞系？1、細(xì)胞系（細(xì)胞株）細(xì)胞系是來自多細(xì)胞生物體的細(xì)胞群體，其通常不會(huì)無限增殖，但是由于突變，逃避了正常細(xì)胞的衰老，從而可以持續(xù)分裂的一種細(xì)胞的集合。因此，細(xì)胞可以在體外長時(shí)間生長。細(xì)胞系是研究多細(xì)胞生物體的生物化學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的非常重要的工具，例如信號(hào)通路、腫瘤殺傷、細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、突變分析、基因表達(dá)、蛋白表達(dá)、細(xì)胞分化等等。此外，永生化的細(xì)胞系也已經(jīng)在生物技術(shù)中得到應(yīng)用，比如建立新來源、新突變的細(xì)胞系。2、克隆細(xì)胞株從一個(gè)經(jīng)過生物學(xué)鑒定的細(xì)胞系用單細(xì)胞分離培...

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耐藥株是怎樣煉成的？

耐藥株是怎樣煉成的？近年來，惡性腫瘤（癌癥）已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅中國人群健康的主要公共衛(wèi)生問題之一。為什么癌癥容易復(fù)發(fā)，很難治愈呢？因?yàn)榻^大部分抗腫瘤藥物，最終都逃不過腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性的命運(yùn)，導(dǎo)致癌癥繼續(xù)發(fā)展。對(duì)于腫瘤細(xì)胞耐藥的產(chǎn)生原因仍然處在研究之中，如何改善腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物耐藥依然是目前研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。01什么是耐藥性？化療是治療惡性腫瘤的方法中有效的手段之一，指用化學(xué)藥物的方法殺死腫瘤細(xì)胞。常用的藥物包括細(xì)胞增殖的抑制劑、DNA損傷修復(fù)途徑的抑制劑，如阿霉素（adri...

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小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞 RGC-5培養(yǎng)小技巧

小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞RGC-5培養(yǎng)小技巧簡(jiǎn)介：培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+1%P/S生長狀態(tài)：貼壁生長不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。將細(xì)胞懸浮在溶液中，隨著溫度降低，細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰，所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡；未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高，如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長，細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞，細(xì)胞便發(fā)生滲漏，因此復(fù)溫時(shí)大量水分會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，造成細(xì)胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑，則可保護(hù)細(xì)胞免受溶...

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小鼠淋巴瘤細(xì)胞YAC-1培養(yǎng)技巧

小鼠淋巴瘤細(xì)胞YAC-1培養(yǎng)技巧培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+1%P/S生長狀態(tài)：懸浮凍存細(xì)胞，不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。將細(xì)胞懸浮在溶液中，隨著溫度降低，細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰，所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡；未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高，如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長，細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞，細(xì)胞便發(fā)生滲漏，因此復(fù)溫時(shí)大量水分會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，造成細(xì)胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑，則可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)損傷和...

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正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞 TM4

正常小鼠睪丸Sertoli細(xì)胞TM4培養(yǎng)條件：DMEM/F12+2.5%FBS+5%馬血清+1%P/S生長狀態(tài)：貼壁生長凍存細(xì)胞，不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。將細(xì)胞懸浮在溶液中，隨著溫度降低，細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰，所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡；未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高，如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長，細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞，細(xì)胞便發(fā)生滲漏，因此復(fù)溫時(shí)大量水分會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，造成細(xì)胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護(hù)...

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小鼠雜交瘤（抗CD2）細(xì)胞 OKT11

小鼠雜交瘤（抗CD2）細(xì)胞OKT11培養(yǎng)條件：IMDM+20%FBS+1%PS生長狀態(tài)：懸浮生長凍存細(xì)胞，不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。將細(xì)胞懸浮在溶液中，隨著溫度降低，細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰，所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡；未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高，如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長，細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞，細(xì)胞便發(fā)生滲漏，因此復(fù)溫時(shí)大量水分會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，造成細(xì)胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑，則可保護(hù)細(xì)胞免受溶質(zhì)...

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小鼠乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記 4T1+luc

小鼠乳腺癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記4T1+luc培養(yǎng)條件：1640+10%FBS+1%P/S生長狀態(tài)：貼壁生長凍存細(xì)胞，不能“一放了之”。水在低于零度的條件下會(huì)結(jié)冰。將細(xì)胞懸浮在溶液中，隨著溫度降低，細(xì)胞外部的水分會(huì)首先結(jié)冰，所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡；未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高，如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長，細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會(huì)受到損壞，細(xì)胞便發(fā)生滲漏，因此復(fù)溫時(shí)大量水分會(huì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，造成細(xì)胞死亡。如果在溶液中加入冷凍保護(hù)劑，則可保護(hù)細(xì)胞免...

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