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培養(yǎng)基中添加了胎牛血清和抗生素后,可長期保存嗎?1.已經(jīng)配制血清及抗生素的新鮮培養(yǎng)液,建議用戶盡快使用完,因?yàn)檠搴涂股刂幸恍┗镜臓I養(yǎng)成分在解凍時(shí)也已經(jīng)開始降解。1.胎牛血清建議保存在-20℃至-80℃醫(yī)用冰箱。血清解凍時(shí),應(yīng)從-80℃先轉(zhuǎn)移至-20℃再轉(zhuǎn)移至2-8℃依次過夜升溫解凍,待胎牛血清在2-8℃基本解凍后,再轉(zhuǎn)移至室溫(16℃-25℃)*解凍分裝備用或密封凍存。胎牛血清在解凍過程中,需要有規(guī)則的輕微搖晃,使之混勻,避免血清中的蛋白物質(zhì)凝聚致使產(chǎn)生絮狀物。血清溶解...
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一、如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?未拆封的血清,一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃,在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi),再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。*溶解后建議盡快使用,若長時(shí)間儲存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混...
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注意事項(xiàng)1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但最好有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避...
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ELISA試劑盒17個(gè)相關(guān)操作技巧如下:1.切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。2.合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。3.在吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的精密度。5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性。6.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。7.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作...
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ELISA的基本原理有三條:抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學(xué)活性;抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。目前市面上的ELISA試劑盒檢測原理主要有以下四種:直接法,間接法,夾心法...
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Elisa試劑盒原理Elisa的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。進(jìn)行檢測時(shí),樣品中的受檢物質(zhì)(抗原或抗體)與固定的抗體或抗原結(jié)合。通過洗板除去非結(jié)合物,再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,此時(shí),能固定下來的酶量與樣品中被檢物質(zhì)的量相關(guān)。通過加入與酶反應(yīng)的底物后顯色,根據(jù)顏色的深淺可以判斷樣品中物質(zhì)的含量,進(jìn)行定性或定量的分析。ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。...
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免費(fèi)代測1血清樣本制備:將收集于分離管的全血樣本在室溫放置2小時(shí)或4℃過夜,然后1000xg離心20min,收集上清。這是一個(gè)讓血液自然凝固的過程,溫度越低,凝集越緩慢,可根據(jù)需要添加促凝劑。2血漿樣本制備:血漿樣本需要抗凝,一般建議用2%EDTA,1%肝素,8%檸檬酸鈉作為抗凝劑采集樣本,并將樣本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃,1000xg離心15分鐘,收集上清。根據(jù)待測目標(biāo)物的性質(zhì)不同選取不同的抗凝劑。組織樣本制備:由于溶血會影響檢測,需用預(yù)冷PBS緩沖液(0.01M,p...
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如何挑選合適的elisa試劑盒?1、查找待測樣本的蛋白濃度可以通過NCBI的文獻(xiàn),給出的蛋白表達(dá)量參考值來比較elisa試劑盒給出的樣本值與報(bào)道值是否一致。2、試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測樣本的種類除試劑盒特別說明外,一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有:血清和血漿(不同抗凝劑),細(xì)胞上清,和細(xì)胞裂解液,試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用。3、?.檢測范圍:?建立線性范圍:需測定9-11個(gè)濃度水平,每個(gè)濃度水平重復(fù)測定3-4次。?驗(yàn)證標(biāo)稱線性參數(shù):需測定4-6個(gè)濃度水平,每個(gè)濃度水...
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