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如何避免細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染?主要還是考慮無菌環(huán)境,盡量做好操作臺的滅菌,別把培養(yǎng)基滴落在生物安全柜的入風(fēng)口,別在培養(yǎng)箱里把培養(yǎng)基打翻。這兩個地方霉菌一旦滋生,那你就只能等著用甲醛熏蒸了。紫外無法殺滅霉菌,酒精也不行,只能用甲醛熏蒸,但是一定要注意安全。復(fù)蘇的時候,水浴鍋也需要進行滅菌處理。一旦出現(xiàn)污染,不要急,能救的就用抗生素救一下,但是一般情況下,選擇扔掉。避免交叉感染,要不只能整個實驗室消毒了。如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?原則上:直接滅菌后丟棄之。當(dāng)重要的培養(yǎng)...
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教你一眼判斷血清的質(zhì)量淡黃色,透明——2小時以內(nèi)的國產(chǎn)新生牛血清,膽紅素含量較少;金黃色,透明——產(chǎn)下較長時間的新生牛血清,一般超過2小時了;金黃色,不透明——產(chǎn)下幾天或更久的小牛血清;淡黃色,帶一點微紅,透明——等級最高的進口胎牛血清,如特級的北美;淡紅色,透明——普通的進口胎牛血清;紅色偏深,透明——普通的進口胎牛血清,南美的居多,采血環(huán)節(jié)不夠嚴(yán)謹(jǐn);紅色偏暗,透明——普通胎牛血清,保存不好,血紅蛋白氧化了;紅色,不透明——進口小牛血清,透明度越差,牛齡越大。
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胎牛血清是傳統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)過程中*的營養(yǎng)組分,可以說選擇正確的胎牛血清直接決定試驗和生產(chǎn)的結(jié)果。中國海關(guān)在其對有資質(zhì)進行血清供應(yīng)的企業(yè)有明確的公示,有興趣的朋友可以查詢《允許向中國出口生物材料(包含血液制品)的國外企業(yè)單》。原料采集是胎牛血清整個生產(chǎn)工序中最關(guān)鍵的步驟,需要在各個血源地政府認(rèn)證的農(nóng)場采集,且確保采集對象為獸醫(yī)監(jiān)管下經(jīng)臨床檢查為健康的動物。揭秘Gibco血清的那些事兒——原料采集篇以下視頻來源于賽默飛生命科學(xué),時長01:19賽默飛世爾科技有限公司是的生命科學(xué)原材料供...
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關(guān)于特級胎牛血清使用的方法進口特級胎牛血清的正確存放與解凍是各位實驗家尤為關(guān)注的一個問題,1、血清必須貯存-20℃,如存放于4℃,請勿超過兩周,對于某些單位一次無法用完一瓶,可在無菌條件下將其40-45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清解凍時體積會增加10%,必須預(yù)留此膨脹體積的空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂的情形。2、一般公司所提供的血清一般為100ml和500ml裝量,因此建議在使用中宜采取逐步解凍的方法解凍血清:-20℃→4℃冰箱或冷庫溶解24小時→室溫下全溶后再...
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千舍精選推薦WinSera®特級胎牛血清1.WinSera®特級胎牛血清來源新西蘭,血源更優(yōu)秀,生產(chǎn)工藝更嚴(yán)格。每批胎牛血清均可提供完整的原產(chǎn)地證、質(zhì)檢報告及海關(guān)進出口資質(zhì),產(chǎn)品安全可追溯。2.具有極低的內(nèi)毒素(小于3EU/mL),蛋白含量適中,既能滿足細(xì)胞生長所需的營養(yǎng),又不會對細(xì)胞造成毒害作用;此外,還對血清中微量元素及多種酶進行了檢測,體現(xiàn)了產(chǎn)品檢測的全面性。3.千舍精選的WinSera®特級胎牛血清,經(jīng)過多種細(xì)胞培養(yǎng)測試,具有優(yōu)異的性能,更適合...
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胎牛血清注意事項如果不能短期內(nèi)使用完畢,解凍后請適當(dāng)分裝。血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此在分裝血清時須使分裝瓶預(yù)留一定體積空間,否則易導(dǎo)致分裝瓶凍裂而發(fā)生污染。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍的血清。加熱過程中需有規(guī)則地?fù)u晃均勻。熱處理的目的是滅活血清中的補體(complement)。除非必須,一般不推薦對血清進行熱處理。因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量。補體參與的反應(yīng)有:細(xì)胞毒作用、平滑肌細(xì)胞收縮、肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺、增強吞噬作用、...
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外泌體的研究離不開細(xì)胞培養(yǎng)。以腫瘤相關(guān)外泌體研究為例,目前,收集腫瘤細(xì)胞外泌體主要有兩種方法:方法一使用正常培液養(yǎng)細(xì)胞再換無血清培液收外泌體。方法二直接使用exosome-freeFBS配制培養(yǎng)基用于培養(yǎng)細(xì)胞收外泌體。首先,就是基本的離心條件了,目前超離比較好的就是貝克曼或者日立的了,這兩家超離在行業(yè)內(nèi)算是翹楚了。其次就是離心參數(shù)了:120000g,4℃,離心14h,離心結(jié)果如圖:1:離心后,血清外泌體會富集在管底和管壁;2:吸取血清時,只吸取澄清部分的血清,并且遠(yuǎn)離上圖中標(biāo)...
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如何鑒定提取出來的外泌體?以目前外泌體的分離手段很難獲得十分純凈而且單一的外泌體樣品,也沒有任何一個單一實驗可以確定外泌體的存在。根據(jù)國際細(xì)胞外囊泡協(xié)會發(fā)表的指導(dǎo)手冊《MISEV2018》,外泌體特征鑒定通過NTA測粒徑分布、TEM電鏡分析形態(tài)、WB檢測標(biāo)志蛋白三項來驗證。NTA分析樣品中外泌體的粒徑分布和顆粒濃度,TEM電子顯微鏡來觀察樣品中外泌體的形態(tài)特征,WB檢測外泌體標(biāo)志蛋白。外泌體如何保存?不同時間、溫度的保存對不同的外泌體樣本影響不一;如果研究方向為外泌體形態(tài)特征...
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