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外泌體抗衰憑什么搶占“風(fēng)頭”?據(jù)研究,在尿液、血清、唾液和母乳等體液中都檢測到了外泌體,可見其分布之廣。從作用原理上,外泌體通過胞吞、胞吐及膜融合的方式進入細胞,將其活性物質(zhì)(如蛋白質(zhì)、DNA、RNA等)釋放至宿主胞質(zhì)溶膠調(diào)控細胞生理功能;也可結(jié)合胞膜受體激活相關(guān)信號通路調(diào)控細胞功能,實現(xiàn)非細胞化再生醫(yī)美治療。另一方面,干細胞進行抗衰是嚴肅的科學(xué)命題,并非簡單的細胞回注就可達到效果,干細胞使用十分嚴格,醫(yī)療機構(gòu)開展的干細胞臨床研究需由兩委局協(xié)同共管,批準才能進行的,臨床許可嚴...
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胎牛血清應(yīng)用廣泛,符合質(zhì)控標準是關(guān)鍵以國內(nèi)滅活病毒疫苗的制造過程為例,主要是通過體外大規(guī)模培養(yǎng)特定的細胞株來繁殖病毒。目前,主流培養(yǎng)液仍然采用基礎(chǔ)培養(yǎng)基加血清的方式,強調(diào)了對有效培養(yǎng)方法和一致材料的迫切需求。正規(guī)來源的胎牛血清不會額外添加其他不明成分,除了含有細胞所需的營養(yǎng)成分及輔助因子之外,還含有轉(zhuǎn)移和結(jié)合蛋白,有緩沖pH和解毒的作用,因而常用于疫苗生產(chǎn)細胞的培養(yǎng)。對于牛血清的應(yīng)用場景,目前國內(nèi)遵循的質(zhì)量標準是2020版《中華人民共和國藥典》三部通則(3604新生牛血清檢測...
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—胎牛血清有必要熱滅活嗎—01目的血清的滅活就是將血清置于56℃作用30min,然后將它們分裝儲存于-20℃。熱滅活的目的是為了去除血清中的補體等對熱敏感的物質(zhì),以排除對免疫分析的影響。胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。研究人員曾對商業(yè)胎牛血清中的補體成分進行測定,他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有的C1、C6僅達成年動物血清的1-3%,而其它補體成分僅有成年動物的5-50%,至于補體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。通過補體固定實驗,我們也在多個不同批次的胎牛血清中獲得了相...
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血清的供應(yīng)量改變帶來的價格波動由于中國海關(guān)總署對供應(yīng)企業(yè)和允許進口的血源地做出了明確規(guī)定,胎牛血清的價格便與這些血源產(chǎn)地的供應(yīng)量息息相關(guān)。胎牛血清是一種天然產(chǎn)物,產(chǎn)地牛源的健康狀況和生長環(huán)境尤為重要,當牛源產(chǎn)地氣候變化時,會極大的影響胎牛血清的產(chǎn)量。例如2018年澳洲地區(qū)發(fā)生干旱,導(dǎo)致農(nóng)場主不得不屠宰超量的牛以避免損失,這種情況間接導(dǎo)致當年澳洲血源的胎牛血清供應(yīng)鏈同比往年有一個顯著的增長。所以說,跟一般的商品不同,胎牛血清的供應(yīng)量并非僅由胎牛血清的市場需求決定,而是由當年的氣...
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一般在拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?收到細胞后先不要開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議對收細胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況一般可以再申請免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培...
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血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?血清在解凍過程(包括沒有*解凍)或儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如凝集素、纖維蛋白原和玻連蛋白等)可能會聚集成團,形成絮狀沉淀或外觀混濁;在運輸過程中,由于時間較長,所以往往有少許解凍,因此也可能稍有沉淀,但這些都不影響血清性能。若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。
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耐藥細胞構(gòu)建方法目前已知的體外建立耐藥細胞株的方法主要有以下幾種:大劑量藥物沖擊法、藥物濃度遞增法、藥物濃度遞增與大劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因結(jié)合藥物篩選法。其中藥物濃度遞增法和大劑量藥物沖擊法成為臨床建立腫瘤細胞化療耐藥模型的常用方法。①藥物濃度遞增法是指最初使用低濃度的藥物刺激細胞,等待細胞適應(yīng)低濃度的環(huán)境之后,再略微提高藥物濃度,繼續(xù)等待細胞適應(yīng)目前的環(huán)境,經(jīng)過反復(fù)的培養(yǎng)和加壓,最終使細胞可以在高濃度的藥物環(huán)境下生存。②大劑量藥物沖擊法是在細胞培養(yǎng)時加入超高藥物濃度的...
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如何構(gòu)建耐藥細胞株?腫瘤細胞對化療藥物產(chǎn)生耐藥性是腫瘤治療失敗的重要因素之一,成為目前阻礙腫瘤治療的絆腳石。因此,探索腫瘤細胞產(chǎn)生耐藥的原因以及如何改善腫瘤細胞對化療藥物耐藥仍是目前研究的熱點和難點。腫瘤細胞耐藥的產(chǎn)生是一個復(fù)雜的過程,它的機制廣泛牽涉到藥物代謝學(xué)、病理學(xué)、生理學(xué)等多個學(xué)科,這就決定了腫瘤細胞對化療藥物產(chǎn)生耐藥的機制是復(fù)雜的,因此體外建立化療藥物耐藥細胞株仍然是研究腫瘤細胞耐藥機制的重要方法。一種藥物長期作用于某類細胞,殺死其中沒有抗性的細胞,而對這類細胞中具...
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