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ELISA試劑盒又稱為酶聯(lián)免疫試劑盒,用于對(duì)液體樣本中的目標(biāo)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量檢測。隨著國家對(duì)科研項(xiàng)目的重視,在科研單位和廣大科研類院校也越來越受歡迎。ELISA試劑盒之所以受歡迎和它自身的優(yōu)點(diǎn)是分不開的。首先適合檢測的樣本很廣泛包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,具體根據(jù)試劑盒說明書決定,通常檢測靈敏度比較高。其次ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應(yīng)結(jié)合起來的一種微量分析技術(shù)。酶標(biāo)記抗原或抗體以后,既不影響抗原抗體反應(yīng)的...
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24、培養(yǎng)中常出現(xiàn)一些黑點(diǎn),是污染嗎?首先肉眼觀察培養(yǎng)液是否變渾濁,如果變渾濁,基本可以確定是污染;如果肉眼觀察培養(yǎng)液沒有變渾濁:在顯微鏡下觀察黑點(diǎn)大小和形狀是否規(guī)則,是否運(yùn)動(dòng),是做布朗運(yùn)動(dòng)還是呈直線型快速移動(dòng)。如果黑點(diǎn)大小不規(guī)則,做布朗運(yùn)動(dòng),黑點(diǎn)可能是細(xì)胞碎片(可能是細(xì)胞狀態(tài)不佳或者消化過度引起的),也可能是血清反復(fù)凍融產(chǎn)生的蛋白沉淀引起的,也可能是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物。如果黑點(diǎn)大小一致,快速移動(dòng),很可能是細(xì)菌污染。25、如何預(yù)防細(xì)胞培養(yǎng)中黑點(diǎn)的產(chǎn)生?掌握細(xì)胞傳代的最佳時(shí)機(jī),不要...
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①保存血清最好方法是什么?我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。但是若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臒o菌容器內(nèi),再放回冷凍。反復(fù)凍融會(huì)對(duì)血清的品質(zhì)造成不良影響。②如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。③血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?血清在解凍過程(包括沒有*解凍)或儲(chǔ)存在2-8℃時(shí),血清中的各...
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經(jīng)費(fèi)不是很充足,但是用量也蠻大,怎么選血清這個(gè)是最多的一個(gè)群體,有些老師有錢,但是這個(gè)錢也是自己辛辛苦苦取得的,所以我覺得可以考慮一些小品牌,但是小品牌不代表是假貨,不代表是國產(chǎn),也不代表是假洋品牌。買的初期,需要去多找?guī)讉€(gè)牌子的試用裝同時(shí)測試。教你一眼判斷血清的質(zhì)量淡黃色,透明——2小時(shí)以內(nèi)的國產(chǎn)新生牛血清,膽紅素含量較少;金黃色,透明——產(chǎn)下較長時(shí)間的新生牛血清,一般超過2小時(shí)了;金黃色,不透明——產(chǎn)下幾天或更久的小牛血清;淡黃色,帶一點(diǎn)微紅,透明——等級(jí)高的進(jìn)口胎牛血清...
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WinSeran細(xì)胞培養(yǎng)常見兩個(gè)問題(抱團(tuán)+空泡問題)細(xì)胞抱團(tuán)怎么處理?一些懸浮細(xì)胞抱團(tuán)生長是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細(xì)胞在細(xì)胞密度很高的情況下,很可能會(huì)出現(xiàn)部分細(xì)胞抱團(tuán)生長的現(xiàn)象,聚團(tuán)細(xì)胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細(xì)胞,因此在培養(yǎng)懸浮細(xì)胞時(shí)需控制好細(xì)胞密度。如果出現(xiàn)了細(xì)胞團(tuán),可以通過細(xì)胞篩去掉部分較大的細(xì)胞團(tuán),也可以嘗試一下方法:將細(xì)胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細(xì)胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細(xì)胞團(tuán))。細(xì)胞內(nèi)有空泡,是否是正常...
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如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?原則上:直接滅菌后丟棄之。當(dāng)重要的培養(yǎng)污染時(shí),研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母,把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開,用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái),檢查HEPA過濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對(duì)一些細(xì)胞系有毒性,因而,做劑量反應(yīng)實(shí)驗(yàn)確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點(diǎn)在使用抗生素如霉素b和抗霉菌素如泰樂菌素時(shí)尤其重要。下面是推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實(shí)驗(yàn)步驟。1.在無抗生素的培養(yǎng)基...
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黑點(diǎn)已經(jīng)產(chǎn)生了,如何進(jìn)行處理?如果判定黑點(diǎn)是污染,請(qǐng)及時(shí)將細(xì)胞處理后丟棄。其他情況,可參照以下進(jìn)行:如果是懸浮細(xì)胞:收集細(xì)胞上清慢速離心(500-600rpm/min,5-6min)并更換新的培養(yǎng)瓶;如果是貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS洗2-3遍,洗的時(shí)候,輕輕拍打培養(yǎng)瓶,讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落,再棄去PBS,消化時(shí)先加低濃度的胰酶如0.05%胰酶消化1min左右,讓細(xì)胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來,去掉低濃度胰酶,然后正常消化細(xì)胞,將收集的細(xì)胞懸液慢速離心(500-600rpm...
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1、一般拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?收到細(xì)胞先不開蓋,用酒精將整個(gè)細(xì)胞瓶外壁進(jìn)行消毒,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各兩張),排除細(xì)胞本身污染的情況。2、何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,常規(guī)細(xì)胞2-3天更換培養(yǎng)基。3、細(xì)胞何時(shí)進(jìn)行傳代較好?一般情況下細(xì)胞生長至*匯合后就應(yīng)該傳代,所有細(xì)胞生長都有一個(gè)要求不宜...
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